27 nov 2023 (Nanowerk Nieuws)
De afgelopen jaren zijn cel- en gentherapieën veelbelovend gebleken voor de behandeling van kanker, cystische fibrose, diabetes, hartziekten, HIV/AIDS en andere moeilijk te behandelen ziekten. Maar het gebrek aan effectieve manieren om biologische behandelingen in het lichaam toe te dienen, heeft een grote barrière gevormd voor het op de markt brengen van deze nieuwe therapieën – en uiteindelijk voor de patiënten die ze het meest nodig hebben.
Nu hebben synthetische biologen van de Northwestern University een flexibel nieuw platform ontwikkeld dat een deel van dit lastige leveringsprobleem oplost. Het toedieningssysteem bootst de natuurlijke processen na die door virussen worden gebruikt en bindt zich aan doelcellen en brengt op effectieve wijze medicijnen naar binnen over.

Key Takeaways

Innovatief toedieningssysteem ontwikkeld met behulp van extracellulaire blaasjes (EV's) om biologische geneesmiddelen effectief naar het lichaam te transporteren, waarmee een groot obstakel in cel- en gentherapie wordt aangepakt.

Aanpasbare EV’s die zijn gemaakt via synthetische biologie en die specifieke medicijnen kunnen vervoeren en afleveren, waaronder CRISPR-genenbewerkingsmiddelen, om cellen zoals T-cellen te targeten.

Het nieuwe systeem biedt potentieel voor een breed scala aan toepassingen, waaronder de behandeling van ziekten zoals kanker, cystische fibrose, diabetes, hartziekten en HIV/AIDS.

Proof-of-concept-experimenten demonstreren succesvolle toediening en genetische bewerking in T-cellen, een uitdagend doelwit in therapeutische toepassingen.

Het GEMINI-platform, dat een integraal onderdeel is van de technologie, maakt genetisch gemanipuleerde multifunctionele EV's mogelijk, wat veelbelovende vooruitgang in de ontwikkeling van cel- en gentherapie belooft.

Een conceptuele weergave van de GEMINI-technologie voor het assembleren van op maat gemaakte voertuigen voor genafgifte. (Afbeelding: Justin Muir)

Het Onderzoek

De werkpaarden achter dit nieuwe platform zijn extracellulaire blaasjes (EV’s) – kleine nanodeeltjes ter grootte van een virus die alle cellen op natuurlijke wijze al produceren. In de nieuwe studie gebruikten onderzoekers de krachtige aanpak van synthetische biologie om DNA-‘programma’s’ te bouwen die – wanneer ze in ‘producent’-cellen worden ingebracht – die cellen sturen om zelf aangepaste EV’s met nuttige oppervlaktekenmerken te assembleren. De programma's sturen cellen ook aan om de EV's te produceren en te laden met biologische medicijnen. In proof-of-concept-experimenten hebben de deeltjes met succes biologische medicijnen afgeleverd – in dit geval CRISPR-genbewerkingsmiddelen die een door HIV gebruikte receptor uitschakelen – naar T-cellen, die notoir moeilijk te targeten zijn. De onderzoekers veronderstellen ook dat het systeem voor veel medicijnen en veel soorten cellen zou moeten werken. Het onderzoek werd gepubliceerd in het tijdschrift (“Het genetisch coderen van meerdere functionaliteiten in extracellulaire blaasjes voor de gerichte afgifte van biologische stoffen aan T-cellen”). Het is het eerste onderzoek waarin EV’s met succes worden gebruikt om vracht in T-cellen af ​​te leveren. “De genomica-revolutie heeft ons begrip van de moleculaire basis van veel ziekten getransformeerd, maar deze inzichten hebben om één fundamentele reden niet geresulteerd in nieuwe medicijnen: het ontbreekt ons aan de technologie die nodig is om gerichte medicijnen af ​​te leveren op specifieke plaatsen in het lichaam waar ze nodig zijn. ' zei Joshua N. Leonard van Northwestern, die het onderzoek leidde. “Deze uitdagingen op het gebied van gedeelde bezorging houden ons tegen. Door breed toegankelijke leveringsplatforms beschikbaar te stellen, kunnen we een groot deel van de risico's en kosten wegnemen die gepaard gaan met het naar klinische onderzoeken of op de markt brengen van nieuwe medicijnen. In plaats van elke keer dat een bedrijf een nieuw medicijn maakt een nieuw toedieningssysteem te ontwerpen, hopen we dat ze in plaats daarvan modulaire, herconfigureerbare platforms zoals de onze kunnen gebruiken, waardoor de snelheid waarmee gen- en celtherapieën worden ontwikkeld en geëvalueerd wordt versneld.” Leonard, een pionier op het gebied van de synthetische biologie, is hoogleraar chemische en biologische technologie aan de McCormick School of Engineering in Northwestern en een belangrijk lid van het Center for Synthetic Biology (CSB). In samenwerking met het Innovation and New Ventures Office van Northwestern lanceerde Leonard in 2022 Syenex om de medicijntoediening voor ontwikkelaars van cel- en gentherapie te helpen oplossen. Syenex is een van de twaalf startups die zijn gehuisvest in het Querrey InQbation Lab, de nieuwe incubator van Northwestern. Het multidisciplinaire team bestaat uit Julius Lucks, hoogleraar chemische en biologische technologie bij McCormick en CSB-lid, en Judd Hultquist, assistent-professor geneeskunde (infectieziekten) en microbiologie-immunologie aan de Northwestern University Feinberg School of Medicine.

De beloften en uitdagingen van gerichte medicijnafgifte

Door defecte genen te vervangen of gezonde nieuwe genen of cellen aan een patiënt toe te dienen, zijn gen- en celtherapieën veelbelovend voor de behandeling van een breed scala aan ziekten. Met behulp van een toedieningsvoertuig komen gentherapieën het lichaam binnen om genetisch materiaal naar specifieke cellen over te brengen om ziekten te behandelen of te voorkomen. Celtherapieën gebruiken een vergelijkbare aanpak, maar dragen volledige cellen over, die doorgaans buiten het lichaam worden aangepast voordat ze worden toegediend. In de meest succesvolle gevallen hebben virale vectoren – die delen gebruiken die zijn afgeleid van virussen maar geen infectie kunnen veroorzaken – gediend als toedieningsmechanisme voor zowel cel- als gentherapieën. Maar deze strategie brengt beperkingen met zich mee. Het immuunsysteem herkent virusdelen soms als lichaamsvreemd en blokkeert dergelijke vectoren voordat ze hun lading afleveren. “Virussen hebben een natuurlijk vermogen om cellen binnen te dringen en vracht af te leveren,” zei Leonard. “Het lenen van virale onderdelen is een effectieve strategie om de verspreiding te bewerkstelligen, maar dan ben je enigszins beperkt tot de soorten overdracht waarvoor het virus is geëvolueerd. Er is aanzienlijk technisch werk nodig om deze systemen zo aan te passen dat hun functies voor elke toepassing worden gewijzigd. In dit verhaal hebben we in plaats daarvan geprobeerd de strategie van virussen na te bootsen, maar we hebben nieuwe biologische ‘onderdelen’ gebruikt om enkele beperkingen van virale vectoren te overwinnen en uiteindelijk nieuwe functionaliteiten mogelijk te maken.” Om een ​​multifunctioneel voertuig te ontwerpen, keken de onderzoekers naar elektrische voertuigen, die Leonard omschreef als ‘een schone lei’. In alle levende wezens (van gist tot planten tot mensen) scheiden cellen op natuurlijke wijze EV's af, waarvan onderzoekers denken dat ze een belangrijke rol spelen in de communicatie tussen cellen en natuurlijke processen zoals de immuunfunctie. “Deze deeltjes worden voortdurend uitgestoten en opgenomen door cellen – zowel bij gezonde processen als bij ziekteprocessen,” zei Leonard. “We weten bijvoorbeeld dat kankercellen EV’s afgeven, en dat lijkt deel uit te maken van het proces waarbij kanker zich van de ene plaats naar de andere verspreidt. Aan de andere kant brengen EV’s ook monsters van binnendringende ziekteverwekkers over van geïnfecteerde cellen naar immuuncellen, waardoor het lichaam een ​​effectieve reactie kan ontwikkelen.”

Een ‘schone lei’ benutten

Voor Leonards EV-gebaseerde platform ontwikkelde en synthetiseerde zijn team aangepaste DNA-moleculen die in een productiecel werden geïntroduceerd. Het DNA gaf instructies aan de productiecel om nieuwe biomoleculen te produceren en die moleculen vervolgens op het oppervlak en in de binnenkant van EV’s te laden. Dit leverde effectief EV’s op die waren voorzien van specifiek ontworpen kenmerken – en lading die al op sleeptouw was. “We behandelen de EV’s die door cellen worden geproduceerd als een onbeschreven blad waarop we nieuwe functies kunnen samenstellen door die productiecellen zo te manipuleren dat ze kunstmatige of natuurlijke eiwitten en nucleïnezuren tot expressie brengen,” zei Leonard. “Deze veranderen de EV-functie en kunnen een bioactieve, therapeutische lading omvatten.” Om succesvol te zijn, moeten de EV's zich op de juiste cellen richten, hun lading naar die cellen overbrengen en bijwerkingen vermijden – en dat alles terwijl ze het altijd waakzame immuunsysteem van de patiënt vermijden. Vergeleken met virussen zijn EV’s waarschijnlijk beter in staat om afstoting door het immuunsysteem te omzeilen. Omdat EV's kunnen worden geproduceerd met materialen die grotendeels in de eigen cellen van de patiënt voorkomen, is de kans kleiner dat het lichaam de deeltjes als een vreemde substantie behandelt.

De T-cel-uitdaging

Om het concept te testen, keken Leonard en zijn team naar een aantrekkelijk maar koppig doelwit: T-cellen. Omdat T-cellen het lichaam op natuurlijke wijze helpen bij het bestrijden van ziektekiemen en ziekten, hebben onderzoekers geprobeerd de natuurlijke capaciteiten van T-cellen voor immunotherapietoepassingen te verbeteren. "De meeste cellen nemen voortdurend monsters van kleine stukjes van hun omgeving", zegt hoofdauteur van het onderzoek, Devin Stranford, afgestudeerd aan Leonard's laboratorium en nu wetenschapper bij Syenex. “Maar om welke reden dan ook doen T-cellen dat niet zo vaak. Daarom is het een uitdaging om medicijnen aan T-cellen af ​​te leveren, omdat ze deze niet actief zullen opnemen. Je moet de biologie goed op orde hebben, zodat die bevallingsgebeurtenissen kunnen plaatsvinden.” In de experimenten hebben de onderzoekers een productiecel ontwikkeld om EV's te genereren die zijn geladen met Cas9, een eiwit dat deel uitmaakt van het CRISPR-systeem, gecombineerd met een ontwikkeld RNA-molecuul om het een specifieke DNA-sequentie in het genoom van een cel te laten herkennen en veranderen. De onderzoekers introduceerden de gemodificeerde EV’s in een kweek van T-cellen. De EV's bonden zich efficiënt aan de T-cellen en leverden met succes hun lading af, wat leidde tot een genetische bewerking die het gen inactiveerde dat codeert voor een receptor die door HIV wordt gebruikt om T-cellen te infecteren. Hoewel de behandeling van HIV-infecties geen onmiddellijk doel van dit project was, illustreert dit werk niettemin die belofte en demonstreert het soort nieuwe therapeutische functies die de technologie mogelijk maakt. “Een belangrijk doel van dit werk was het gebruik van rigoureuze methoden om ervoor te zorgen dat de lading helemaal op de plek terechtkwam waar ze heen moest”, aldus Leonard. "Omdat we wijzigingen aanbrengen in het genoom van deze cellen, kunnen we krachtige technologieën zoals sequencing van de volgende generatie gebruiken om te bevestigen dat die exacte bewerkingen aanwezig waren in de ontvangende cellen, op de locatie van het genoom waar ze bedoeld waren."

What’s next?

Het nieuwe platform, genaamd GEMINI (Genetic Encoded Multifunctional Integrated Nanovesicles), vertegenwoordigt een reeks technologieën voor het genetisch manipuleren van cellen om multifunctionele EV's te produceren om aan de uiteenlopende behoeften van patiënten te voldoen. “Afhankelijk van de behandeling heb je misschien een miljard EV’s nodig”, zei hij. “Maar omdat ze zo klein zijn, gaat het eigenlijk om een ​​heel klein beetje materiaal. Anderen hebben al aangetoond dat EV’s op klinisch vertaalbare manieren op commerciële schaal kunnen worden geproduceerd. Een bijzonder voordeel van het biologisch coderen van EV-functies, zoals wij hebben gedaan, is dat alle complexiteit in de engineering van de DNA-programma's zit. Als dat eenmaal is gebeurd, zijn dergelijke processen gemakkelijk compatibel met volwassen, bestaande productiemethoden.” Via Syenex hoopt Leonard het GEMINI-platform, naast andere synthetische biologietechnologieën, te gebruiken om snel de beste leveringsvoertuigen te genereren waarmee ontwikkelaars – variërend van academische spin-outs tot volwassen biotechnologiebedrijven – nieuwe, levensveranderende cellen en genen kunnen ontwerpen. therapieën. “Door het vermogen aan te tonen om lading- en oppervlaktesamenstellingen van nanoblaasjes genetisch te coderen met het GEMINI-platform, kunnen we een moeilijk biologieprobleem omzetten in een eenvoudiger DNA-engineeringprobleem”, aldus Leonard. “Dat stelt ons in staat gebruik te maken van de voortdurende exponentiële verbeteringen in de DNA-synthese en sequencing die de groei van de synthetische biologie hebben gestimuleerd. We zijn optimistisch dat deze benaderingen onderzoekers in staat zullen stellen de grote uitdagingen op het gebied van de levering op te lossen en nieuwe en verbeterde behandelingen te ontwikkelen waar een breed scala aan patiënten baat bij heeft.”

• Door SEO aangedreven content en PR-distributie. Word vandaag nog versterkt.
• PlatoData.Network Verticale generatieve AI. Versterk jezelf. Toegang hier.
• PlatoAiStream. Web3-intelligentie. Kennis versterkt. Toegang hier.
• PlatoESG. carbon, CleanTech, Energie, Milieu, Zonne, Afvalbeheer. Toegang hier.
• Plato Gezondheid. Intelligentie op het gebied van biotech en klinische proeven. Toegang hier.
• Bron: https://www.nanowerk.com/news2/biotech/newsid=64123.php